OCI-LY3人弥漫大B细胞淋巴瘤细胞

产品名称：OCI-LY3

中文名称：人弥漫大B细胞淋巴瘤细胞

细胞数量：1×10⁶细胞数

组织来源：弥漫大B淋巴瘤；男性

细胞种属：人
生长特性：悬浮
细胞污染：HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌检测阴性。
培养基：1640，90%；FBS，10%；双抗。
传代方法：Maintain cultures at a cell concentraion between between 1×10⁵ and1×10⁶viable cells/ml.

培养条件：Atmosphere: Air, 95%; CO2, 5%。Temperature: 37℃

     细胞传代步骤：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。

3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。

4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

　　复苏细胞步骤：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

　　细胞冻存步骤：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例；  1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶，细胞变圆脱落后，加入2ml完全培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1×10⁵个细胞冻存。3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

　　细胞冻存：Freeze medium: FBS/NBS, 92%;DMSO, 8%（for reference）Storage temperature: liquid nitrogen vapor phase

　　细胞运输：干冰运输(2ml冻存管)或活细胞运输（T25细胞瓶）