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产品描述

种属: 人源(Homo sapiens

组织来源: 胸腔积液(Pleural effusion)

疾病: 淋巴瘤(Lymphoma)

年龄: 73岁(73 years)

性别: 女(Female)

细胞类型: B细胞淋巴瘤(B cell lymphoma)

生长特性: 悬浮生长(Suspension)

 

拆包 & 存储

1. 请立即检查包装袋是否有破损或漏液

2. 请立即将细胞培养瓶从包装盒中取出,并按照下方操作步骤进行培养传代

注意:如为冻存管,请收到后立即解冻培养。若来不及解冻,请储存于液氮中(存储于负80度,会降低细胞存活率)

 

培养瓶中细胞操作步骤

对于悬浮培养的细胞,寄送前,我们会将培养基充满整个培养瓶,以减少产品运输过程中细胞所受震荡。

1. 收到细胞产品后,请注意观察是否有污染。将培养瓶置于倒置显微镜下仔细检查是否浑浊、是否细菌污染。

2. 将培养瓶竖直放置于37℃培养箱中直至温度平衡,随后,在生物安全柜中,转移培养瓶中的细胞至离心管中,离心200×g / 5 - 10 min,去除上清后,用5mL培养基吹散细胞。

3. 对上述细胞悬液进行细胞计数及活力检测,调整细胞密度至2-3×10^5 cells/mL,并转移至新的培养瓶中。

4. 将培养瓶竖直放置于含有5%CO₂的37℃恒温培养箱中培养。如果细胞达到传代培养的密度,则进行传代培养。

 

冻存细胞操作步骤

注意:为保存细胞的高存活率,请收到产品后,立即解冻培养。

1.将冻存管置于37℃ 水浴中来回晃动,迅速解冻。为避免污染, 确保冻存管口置于水面之上。解冻需迅速,大约2分钟。

2. 一旦冻存管中液体融化后,立即取出,采用 70%酒精喷拭冻存管表面。从此步开始,后续操作须在生物安全柜中完成。

3.将冻存管中的液体转移到含有5mL完全培养基的离心管中, 离心200×g / 5 - 10 min,用真空泵去除含有冻存液的上清。

4. 用完全培养基重新悬浮细胞并转移到新的培养瓶中。为保证细胞复苏的存活率,请将培养基在37℃水浴预热后使用。

5. 将细胞置于含有5%CO₂的37℃恒温培养箱中培养。

 

悬浮细胞传代培养

悬浮细胞的传代可通过补加或置换新鲜培养基的方式来完成, 具体做法如下:

1. 取出少量细胞悬液进行细胞计数及活力检测,当细胞密度达到1.5×10^6 cells/mL 时,进行细胞传代培养。

2. 取足量细胞加入到盛有新鲜培养基的培养瓶中,将细胞密度维持在5×10^5 cells/mL。

3. 将培养瓶竖直放置于含有5%CO₂的37℃恒温培养箱中培养。如果细胞达到传代培养的密度,则进行传代培养。

培养基换液: 每隔 2 至 3 天。

注意:

培养瓶应使用带滤膜瓶盖,以保持培养基中的空气和CO₂

 

完全培养基配制

该细胞系培养所用基本培养基为RPMI1640 Medium,配置完全培养基时需加入10%FBS,1% Anti-Anti。

 

使用范围

本产品仅限于科学研究,绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用。

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