OE-19人食管癌细胞

种属: 人源（Homo sapiens）
组织来源: 食管（Oesophagus）
疾病: 食管腺癌（Esophageal adenocarcinoma）
年龄: 72岁（72 years）
性别: 男（Male）
细胞类型: 表皮细胞（Epithelial）
生长特性: 贴壁生长（Adherent）

拆包 & 存储
1. 请立即检查包装袋是否有破损或漏液
2. 请立即将细胞培养瓶从包装盒中取出，并按照下方操作步骤进行培养传代
注意：如为冻存管，请收到后立即解冻培养。若来不及解冻，请储存于液氮中（存储于负80度，会降低细胞存活率）

培养瓶中细胞操作步骤
对于贴壁培养的细胞，寄送前，我们会将培养基充满整个培 养瓶，以减少产品运输过程中贴壁细胞的脱落。
1. 收到细胞产品后，请注意观察是否有污染。将培养瓶置于倒置 显微镜下仔细检查是否浑浊、是否细菌污染。因在运输过程中存 在颠簸，且有些细胞对温度变化也很敏感，可能存在一些细胞脱 落漂浮的情况，这些细胞仍是活细胞，请勿丢弃，可离心富集后 传代使用。
2. 对于贴壁的细胞，在生物安全柜环境中，用真空泵去除培养瓶 中的多余培养基，至剩余5-8mL左右，随后将细胞置于含有5%CO₂ 的37℃恒温 培养箱中培养，拧松瓶盖。如果细胞已经长满培养瓶 请立即传代。
3. 对于悬浮的细胞，在生物安全柜环境中，转移培养瓶中的细胞 至离心管中，离心200×g / 5 - 10 min，去除上清后，用5 mL培养基 吹散细胞，转移至新的培养瓶中，随后置于含有5% CO₂ 的37℃恒 温培养箱中培养。

冻存细胞操作步骤
注意：为保存细胞的高存活率，请收到产品后，立即解冻培养。
1.将冻存管置于37℃ 水浴中来回晃动，迅速解冻。为避免污染，确保冻存管口置于水面之上。解冻需迅速，大约2分钟。
2. 一旦冻存管中液体融化后，立即取出，采用 70%酒精喷拭冻存管表面。从此步开始，后续操作须在生物安全柜中完成。
3.将冻存管中的液体转移到含有5mL完全培养基的离心管中， 离心200×g / 5 - 10 min，用真空泵去除含有冻存液的上清。
4. 用完全培养基重新悬浮细胞并转移到新的培养瓶中。为保证细胞复苏的存活率，请将培养基在37℃水浴预热后使用。
5. 将细胞置于含有5%CO₂ 的37℃恒温培养箱中培养。

贴壁细胞传代培养
1. 吸取并弃掉培养瓶中培养基, 加入PBS清洗一次。
2. 加入 1.0 mL 0.25（w/v）Trypsin-0.53mM EDTA溶液，并置于37℃培养箱中孵育，直至细胞从壁上脱落分离。此过程大约需要3至5分钟（此处为12.5 cm²培养瓶所用体积，可根据实际情况增减用量）。
3. 加入2mL完全培养基中和胰蛋白酶，并轻轻吹打将细胞从培养瓶表面吹落，并使细胞分散。
4. 离心200x g/5 min，去除上清后，取适量的培养基将细胞重悬, 取适量悬液置于新的培养瓶中，并加入新鲜细胞完全培养基至总 体积为4mL。
5. 将细胞置于含有5%CO₂ 的37℃恒温培养箱中培养。
传代比例：建议 1:2 至 1:4（以培养瓶底面积计算）
培养基换液: 每隔 2 至 3 天。

推荐培养基

1） 准备1640培养基；优质胎牛血清，10%；双抗，1%。

2） 培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。

使用范围
本产品仅限于科学研究，绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用。