大鼠骨骼肌卫星细胞

　　大鼠骨骼肌卫星细胞

　　一、产品简介

　　1. 产品名称：大鼠骨骼肌卫星细胞

　　2. 组织来源：骨骼肌组织

　　3. 产品规格：5×10⁵/T25培养瓶

　　4. 细胞简介：

　　大鼠骨骼肌卫星细胞分离自四肢肌肉组织；骨骼肌又称横纹肌，肌肉中的一种，约占全身重量的40%。骨骼肌纤维为长柱形的多核细胞，肌膜的外面有基膜紧密贴附。属于横纹肌，横纹肌还包括心肌与内脏横纹肌，其中骨骼肌主要分布于四肢。每块肌肉都是具有一定形态、结构和功能的器官，有丰富的血管、淋巴分布，在躯体神经支配下收缩或舒张，进行随意运动。

　　肌肉可根据共形状、大小、位置、起止点、纤维方向和作用等命名。依形态命名的如斜方肌、菱形肌、三角肌、梨状肌等。骨骼肌细胞呈纤维状，不分支，有明显横纹，核很多，且都位于细胞膜下方。肌细胞内有许多沿细胞长轴平行排列的细丝状肌原纤维。每一肌原纤维都有相间排列的明带（Ⅰ带）及暗带（A带）。

　　明带染色较浅，而暗带染色较深。暗带中间有一条较明亮的线称H线。H线的中部有一M线。明带中间，有一条较暗的线称为Z线。两个Z线之间的区段，叫做一个肌节。肌卫星细胞指骨骼肌中除骨骼肌纤维（肌细胞）外的一种扁平、有突起的细胞。着于肌纤维（肌细胞）表面；当肌纤维（肌细胞）受损后，肌卫星细胞可增殖分化，参与肌纤维（肌细胞）的修复，因此具有干细胞性质。

　　5. 方法简介：

　　实验室分离的大鼠骨骼肌卫星细胞采用胰蛋白酶胶原酶混合消化法结合多次差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10⁵/T25培养瓶。

　　6. 质量检测：

　　实验室分离的大鼠骨骼肌卫星细胞经Desmin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

　　7. 培养信息：

　　包被条件： PLL（0.1mg/ml）

　　培养基： 推荐使用原代骨骼肌卫星细胞培养体系及正确的操作方法进行培养，可维持细胞最近生长状态。

　　换液频率： 每2-3天换液一次

　　生长特性： 贴壁

　　细胞形态： 成纤维细胞样

　　传代特性： 可传3-5代左右；3代以内状态最佳

　　传代比例： 1:2

　　消化液： 0.25%胰蛋白酶培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

　　大鼠骨骼肌卫星细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。

　　使用方法

　　大鼠骨骼肌卫星细胞是一种贴壁细胞，细胞形态呈成纤维细胞样，在技术部标 准操作流程下，细胞可传3-5代左右；3代以内状态最佳；建议您收到细胞后尽快进行相关实验。客户收到细胞后，请按照以下方法进行操作。

　　1. 取出T25细胞培养瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h，以稳定细胞状态。

　　2. 贴壁细胞消化

　　1）吸出T25细胞培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；

　　2）添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至T25培养瓶中，轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后，吸出多余胰蛋白酶消化液，37℃温浴1-3min；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后，再加入5ml完全培养基终止消化；

　　3）用吸管轻轻吹打混匀，按传代比例接种T25培养瓶传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养；

　　4）待细胞完全贴壁后，培养观察；之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。

　　3. 细胞实验

　　因原代细胞贴壁特殊性，贴壁的原代细胞在消化后转移至其他实验器皿（如玻璃爬片、培养板、共聚焦培养皿等）时，需要对实验器皿进行包被，以增强细胞贴壁性，避免细胞因没贴好影响实验；包被条件常选用鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2） ，多聚赖氨酸PLL（0.1mg/ml），明胶（0.1%），依据细胞种类而定。悬浮/半悬浮细胞无需包被。

　　注意事项

　　1.收到细胞后，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。

　　2.收到细胞先不开瓶盖，瓶身擦拭酒精后放在培养箱静置2-4小时（视细胞密度而定）稳定细胞状态。接着在倒置显微镜下观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收细胞时就整体外观拍一张照片，观察培养基的颜色和是否有漏液情况，随后在显微镜下拍下细胞状态，100*，200*各一张），观察记录细胞在运输过程中是否有污染情况。作为我方进行销售依据。

　　3.由于细胞状态受环境、操作和运输等多方面因素影响，故本公司只保证客户收到细胞后一周内的细胞状态，故客户需要售后时需出示收到细胞的时间证明及客户提供收货时间和发现问题后客服人员沟通的时间证明，期间间隔时间不能大于7天。

　　4.所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物安全台内操作，并请注意防护，所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。

　　5.客户在细胞培养过程中，有任何技术问题，我们随时给予解答。